一般性
免疫固定は、生物学的サンプル中に存在するガンマグロブリンの同定および分類を可能にする実験室試験である。
詳細には、分析は、それらの特定の電気泳動移動度に従って、患者の血液または尿中で免疫グロブリンクラス （ＩｇＡ、ＩｇＧ、ＩｇＭ、ＩｇＥまたはＩｇＤ）および軽鎖カッパまたはラムダのタイプを研究することを可能にする。 。 続いて、どのガンマグロブリンが関与しているかを同定するために、免疫固定化は、その断片に対する特異的抗原または対応する抗体（ 抗免疫グロブリン抗血清 ）の接種を含む：疑われる変化の存在は、形成によって確認される。肉眼または顕微鏡で見える沈殿物の。
この情報は、特に形質細胞病理学 （ガンマ病または形質細胞異常症）の診断を確立するために非常に重要である。 免疫固定は、 多発性骨髄腫 、 Waldenstromのマクログロブリン血症 、および原発性アミロイドーシス （軽鎖アミロイドーシスとも呼ばれる）の評価およびモニタリングに非常に有用です。
何
免疫 固定法 （または免疫電気泳動法 、頭字語IFEと略されることもある）は、 どのクラスの免疫グロブリン （IgG、IgM、IgA、IgD、IgE）または軽鎖カッパもしくはラムダの種類が存在するかどうかを決定できる技術である。患者の血清および尿に過剰または欠陥がある。
カッパおよびラムダ軽鎖は、モノクローナル成分、すなわち同じ同一の化学構造を有する抗体を特徴付ける。
血清および尿中の免疫固定：それはいつ示されるのか？
形質細胞性形成異常またはgammopathiesは、以下によって特徴付けられる原因不明の異質性の疾患群です。
- B細胞クローンの不均衡な増殖。
- 血清および／または尿中に、構造的および電気泳動的に均一（ モノクローナル ）な種類の免疫グロブリン （またはそのポリペプチドサブユニット）が存在すること。
通常、形質細胞異常症は、血清および尿中タンパク質の電気泳動とそれに続く血清免疫固定法 （IFE）を用いて診断されます。
同時に、血液検査で免疫グロブリンの総濃度 （IgG + IgM + IgA）を測定するように処方することができます。
もっと知るために：免疫グロブリン - それらが何であるか、それらがどのように測定されるか、そして参考値»免疫固定：基本原則
免疫固定法は、 2つのフェーズ （最初にアガロースゲルでの電気泳動 、次に特定の抗血清による免疫沈降 ）を含む検査です。
免疫固定の最初のステップは、タンパク質の電気泳動（またはprotidogramma）のそれと同じです。したがって、いくつかの概念を覚えておく必要があります：
- 電気泳動は、血清中または他の生物学的サンプル中に存在するタンパク質の量を決定することを可能にし、そして各画分について、品質に関して何らかの異常があるかどうかを明らかにする実験室分析である。 特に、この検査では、タンパク質を5つのグループに分けることができます。 アルブミン 、 アルファ1グロブリン 、 アルファ2グロブリン 、 ベータグロブリン 、 ガンマグロブリン 。 後者は免疫固定法でより具体的に調査されます。
- 電気泳動は、直流によって生成された、 電場の影響下で、溶液および不活性支持媒体を通る、荷電粒子の異なる移動速度に基づく分離方法である。 実際には、検査は患者のサンプルに存在するタンパク質の 電荷と 分子量を利用します。 電場の衝撃の下で、これらの巨大分子は移動し、タイプによって「グループ化」し、独特の方法でストレスに反応する。 結果（ 電気泳動追跡 ）は、タンパク質画分が対応する様々なピークおよび曲線からなる。 通常、最初のピークはより高くそしてより狭く、 アルブミンのそれです。 従うために、我々はアルブミンよりはるかに低いグロブリンピークを観察する。 経路内に形成されるピークの振幅と強度の増減は、各カテゴリにタンパク質が多かれ少なかれ存在することを示しています。 バンド内に存在するタンパク質が多いほど、それぞれのピークは高くなります。 ガンマグロブリンの場合、異なるクラス（IgA、IgM、IgGなど）のそれぞれの量を知りたいのであれば、単回投与に頼る必要があるだろう。 一般に、バンドに含まれるガンマグロブリンが多いほど、それぞれのピークは高くなります。 高さは特定のカテゴリーに属するタンパク質の総量に対応します。
免疫学は提供します：
１）アガロースゲル電気泳動 ：患者の試料（血清または尿）を電気泳動ストリップ、すなわち遊走用支持体（通常はアガロースゲル）上に置く。 直流によって生成された電場の印加を通して、異なる帯域における分離が得られる。 実際には、混合物中に（すなわち患者サンプル中に）存在する各タイプのガンマグロブリンは分子量と電荷に基づいて移動する。 ガンマグロブリンの異なる電気泳動移動度はそれらを同定することを可能にし（それらの各々は電気泳動経路における特定のバンドと一致する）そしてあらゆる異常を観察することを可能にする。
２）特異的抗血清による免疫沈降（固定） ：特異的抗体またはフラグメントに対する特異的抗原を各電気泳動ストリップ（抗ＩｇＧ、抗ＩｇＡ、抗ＩｇＭ、抗軽κまたは抗鎖）に個々に添加する。ラムダ軽鎖）。 モノクローナルタンパク質が存在する場合、抗原と対応する抗体との相互作用は、狭帯域（これは結果が陽性であることを意味する）および裸眼または顕微鏡で見える沈殿物の形成を生じるであろう。 最後に、サンプルを処理して（すなわち洗浄して着色して）沈殿していないタンパク質を除去し、ゲルを乾燥させて結果を読み進める。
実行される理由
免疫固定術とは何ですか？
血清免疫固定法は、特にそれがモノクローナル成分の産生に関係している場合（ モノクローナルガンマグロブリン血症 ） 、ガンマグロブリンの変化を特徴とする疾患を診断またはモニターするために必要とされる検査です。
もっと詳しく知りたい方は：モノクローナルGammopathies - なにがなんである»免疫固定は、形質細胞異常症が疑われる場合に有用であり、 MIELOMA （および関連する病理学）およびMGUS （「不明確な意味のモノクローナルガンマ病」の頭字語）の研究にとって基本的なものである。
このテストでは、 Waldenstromのマクログロブリン血症と軽鎖アミロイドーシス （ AL ）も評価できます。
免疫固定：検査はいつ処方されますか？
免疫固定の適応症は、血清または尿中のモノクローナル抗体または免疫グロブリンの 変化の疑いを生じさせる臨床的または実験室的証拠に続くものである。
例えば、この検査は血清保護的または尿中電気泳動の結果を深めることを可能にする：電気泳動的追跡において、ガンマグロブリンに対応するバンドが正常から逸脱している場合、免疫固定法は量に関して、これらのタンパク質のどれが変化するかを識別するそして質。
まとめると、血清免疫固定法を処方することができます：
- 他の臨床検査で異常が認められた場合、正常値と比較して血漿タンパク質が存在しないか、それより少なくても量が多い場合。
- 以下のような、モノクローナル成分の産生を特徴とする疾患の存在が疑われる場合
- 多発性骨髄腫とその変種。
- ワルデンストロームのマクログロブリン血症。
- アミロイドーシス;
- 以下のような、単クローン性免疫グロブリン血症または多発性骨髄腫の存在を示唆する症状および徴候が患者が発症した場合：
- 骨の痛み
- 貧血;
- 疲れやすい
- 再発性感染症
- 原因不明の骨折
多発性骨髄腫の場合、タンパク質の電気泳動および免疫固定は、疾患の進行をモニターするためにもかなり有用である（追跡調査）。
免疫固定：どのサンプルで実施できるか
免疫固定を受けることができる生物学的サンプルは主に以下のとおりです。
- 血清 （血清免疫固定）。
- 尿 （尿中免疫固定）。
- 酒* （酒免疫固定）。
* 注 ：CSFまたは脳脊髄液は脳、脊髄、脳神経および脊髄の根を透過して保護する液体です。
正常値
モノクローナルまたはポリクローナルガンマグロブリンに対する血清および尿中免疫固定の否定的結果は、正常とみなされる。
ガンマグロブリン
ガンマグロブリンは、全血漿タンパク質の9〜20％を占めます。
- 参考値ガンマグロブリン ： 0.9-1.4 g / dl
免疫グロブリンの総濃度 （ ＩｇＧ ＋ ＩｇＭ ＋ ＩｇＡ ）に関しては、６００から２３００ｍｇ ／ ｄｌの間の値が正常であると考えられている。
- 参考値血清中の免疫グロブリン ：
- IgA ：90〜400 mg / dl
- IgG ：800〜1800 mg / dl
- IgM ：60〜280 mg / dl
- IgD ：0.3-0.4 mg / dl
- IgE ：20〜440 mg / dl
注 ：検査の参照間隔は、分析ラボで使用される年齢、性別、および機器によって多少異なる場合があります。 このため、レポートに直接記載されている範囲を参照することをお勧めします。 分析の結果は、患者の病歴を知っている一般開業医によって全体として評価されなければならないことも覚えておくべきです。
高い値 - 原因
ガンマグロブリンの増加は：
- ポリクローナルは 、免疫グロブリンの産生が不均一である場合、すなわち、異なるプラズマ細胞から産生されるかまたは由来するガンマグロブリンのすべての成分が増加の影響を受ける。
- ガンマグロブリンが単一タイプ（クローン）の形質細胞から産生または誘導される場合は、 モノクローナル 。
ポリクローナルガンマグロブリンの増加は以下と関連している可能性があります。
- 慢性炎症性疾患
- 慢性関節リウマチ
- 全身性エリテマトーデス。
- 慢性肝疾患（肝炎や肝硬変など）
- 急性および慢性の感染症
- 最近の予防接種
- いくつかの腫瘍性疾患
モノクローナルガンマグロブリンの値が高い場合は、代わりに、
- いくつかの新生物および慢性的な炎症。
- 多発性骨髄腫
- リンパ腫;
- ワルデンストロームのマクログロブリン血症。
過剰なガンマグロブリンは高ガンマグロブリン血症と呼ばれ、欠乏症は低ガンマグロブリン血症として知られています。
低い値 - 原因
ガンマグロブリンの減少は、 無ガンマグロブリン血症 、または続発性免疫不全症 （例、AIDS、腎不全、急性敗血症およびクッシング症候群）を含む免疫学的根拠のさまざまな疾患の遺伝的根拠による存在を示している可能性がある。
ガンマグロブリン値の減少は、細胞増殖抑制薬、免疫抑制薬およびステロイドの使用にも左右される可能性があります。
実行方法
血清免疫固定
血清免疫固定は、腕の静脈からの単純な採血を含みます。 血清は生物学的サンプルの遠心分離によって得られる。 これは、実際には、血液を含む液体（血漿）から細胞を含む画分（血球部）を分離することを可能にする。 血清には凝固因子（フィブリノーゲン、第VIII因子、第V因子、プロトロンビン）が含まれていません。
尿中免疫固定
尿中の免疫固定を行うには、少量の尿を特別な滅菌容器に集める必要があります。 医者および実験室の徴候に基づいて、サンプルは正確なタイミングなしで（ 任意に ）または24時間以内に収集されることができる。
酒の免疫固定
この分析では、脊髄腔内に針を挿入して少量の脳脊髄液を採取する必要があります（ 腰椎穿刺 ）。
準備
免疫固定：あなたはどのように試験の準備をしますか？
- 採血の前に、いくつかの検査室はあなたに少なくとも10-12時間の断食を観察するようにあなたに要求するかもしれません。 この間、少量の水を入れることができます。
- 免疫固定化は、一日のうちの特定の時間に（無作為に）または24時間の間に採取された尿に対して行うことができるので、適切な滅菌容器を事前に入手する必要がある。
- 酒の免疫固定に関しては、代わりに、特別な準備は必要ではない。
試験の結果を変えることができるものは何ですか？
免疫固定の結果に影響を与える可能性がある薬もあるため、進行中の薬物療法を医師に報告することをお勧めします。
検査の6ヶ月前には、ワクチンの投与（予防接種）やフェニトイン、プロカインアミド、経口避妊薬、メタドン、治療用ガンマグロブリンなどの薬物の使用により、免疫グロブリンの濃度が上昇することがあります。 テスト結果を変えることができる他の薬はコルチコステロイド、ネオマイシン、アセチルサリチル酸とクロルプロマジンです。
結果の解釈
免疫固定の結果は他の分析の結果と組み合わせて評価される。 所見の解釈は、特定の疾患に対する特定のガンマグロブリン（例えば、免疫グロブリンGと一致するバンド）に影響を与える変化を特定し比較することができる一般開業医または参照の専門家の責任です。 この評価は診断仮説を確認または支持する：一般に、免疫固定は正常なガンマグロブリンプロファイルを明らかにするかまたはモノクローナルタンパク質もしくはポリクローナルモデルを同定することができる。
疾患が定義されたら、免疫固定術を以下のために実施することができます。
- 病気を経時的に監視し 、その後その経過をたどる（フォローアップ）。
- 治療プロトコルの有効性を確認してください 。
免疫固定の長所と短所
タンパク質電気泳動と比較して、免疫固定：
- それは速いです：予防接種の結果は通常3時間以内に得られます。
- それはより敏感です （わずかですが）：免疫固定は、特に低濃度（1グラム/リットル未満）で、タンパク質電気泳動から除外される免疫グロブリンを明らかにすることができます。
さらに、免疫固定：
- 部分的に自動化することもできます。
- それは容易に読解可能で解釈可能です。
しかしながら、免疫固定はタンパク質電気泳動よりも高価であり、そしてガンマグロブリン分析のみを可能にする。
正常な結果
免疫固定では、通常の方法は以下のとおりです。
- より暗い免疫グロブリンG（ IgG ）と一致するバンド。
- 最も軽い免疫グロブリンＡ（ ＩｇＡ ）に対応するバンド。
- 免疫グロブリンＭ（ ＩｇＭ ）のバンドが存在しない。
- カッパバンドは、 ラムダ （軽鎖）のそれよりも密度が高く、2：1の比率です。
通常の結果では、バンドは大きく、免疫電気泳動ストリップの端部に向かって色濃度が徐々に均一に減少している。
ポリクローナルガンマグロブリン
場合によっては、すべての免疫固定バンドが同程度に均一に隠されています。 このモデルはポリクローナル免疫グロブリンの存在を表す。 この場合もまた、バンドは広く、免疫電気泳動ストリップの端部への移行は緩やかである。 通常存在しないIgMバンドは広いです。
モノクローナルガンマグロビン
鋭い縁を有する狭い帯が免疫固定の経路において同定され得る場合、それはモノクローナル成分の検索が陽性であることを意味する。
モノクローナル免疫グロブリンの同定は、以下の症状の診断に役立ちます。
- 意義不明の単クローン性免疫グロブリン血症（MGUS）。
- 多発性骨髄腫
- ワルデンストロームのマクログロブリン血症。
- アミロイドーシス。
さらに、免疫固定は、形質細胞疾患（すなわち、多発性骨髄腫およびWaldenstromのマクログロブリン血症）における治療を監視するために使用され得る。 モノクローナルタンパク質のレベルが化学療法後に減少するか検出できない場合は、 治療に対する反応を示している可能性があります。 対照的に、治療にもかかわらず持続するモノクローナルタンパク質は難治性疾患の徴候です 。
ご了承ください 。 免疫固定陰性の結果が、形質細胞異常症を必ずしも除外するわけではない。 例えば、非分泌型多発性骨髄腫またはオリゴ分泌は、尿中および血清中の両方で否定的な結果をもたらす可能性があります。 それ故、ガンモパシーの診断疑いが依然として高い場合は、カッパ／ラムダリベア軽鎖の 比 （ Ｋ ／ Ｌ比 ）の決定が示される。
多発性硬化症の免疫固定と診断
医者が多発性硬化症の存在を疑うとき、 脳脊髄液 （液）の免疫固定が処方されます。 この場合、決定される経路は、いわゆるオリゴクローナルバンドの存在を際立たせるので、特徴的である。 結果は検査室報告書に陽性として報告されている。 それらは髄腔内ガンマグロブリンの産生と相関するので、バンドは血清免疫固定において通常観察されないと考えられるべきである。
しかしながら、脳脊髄液中のオリゴクローナルバンドで他の状態が起こり得るので、この発見は必ずしも診断を確認するものではないことに注意すべきである。
言い換えれば、液体免疫固定法を用いたオリゴクローナルバンドの同定は多発性硬化症の診断を支持するのに非常に有用であるが、 他の調査によって確認されなければならない 。 この結果をもたらす可能性がある他の状態は、中枢神経系の炎症であり、これにはＨＩＶ関連脳炎、神経梅毒、神経サルコイドーシス、ライム髄膜脳炎、ＣＮＳ悪性腫瘍、視神経脊髄炎および横断性脊髄炎が含まれる。
