テスト

抗酸化力測定テスト

エッセイABTS

それは、分光光度測定を使用してサンプルの抗酸化能を決定する分析方法です。 UV − Vis分光光度計を使用して、ABST(2,2'−アジノビス(3−エチルベンゾチアゾリン−6−スルホネート)、形態の無色の物質)の酸化によって生成されたラジカルABTS・+を含有する溶液の吸光度を測定する。水素と電子の両方を移動させることによって作用することができる酸化防止剤分子のABTS•+の溶液への添加は、無色の形へのラジカルの還元を決定します。存在する酸化防止剤の量に比例するこの漂白は、特定の波長(734nm)での一定時間にわたる吸光度の減少として測定することができる。参照標準として選択された既知量の酸化防止剤分子について測定された吸光度値、通常はアスコルビン酸またはトロロックス(この場合は) 私達はTEAC Troloxの同等の酸化防止容量の酸化防止活性の話します。

ABTSの使用に基づく抗酸化力測定は、単純かつ迅速であるという利点を有する。 さらに、それは広いpH範囲で親水性および親油性の両方の抗酸化物質の測定を可能にする。 ただし、使用するラジカル(ABTS•+)は生理的なものではなく、生体系には存在しないこと、およびさまざまな抗酸化剤の反応速度論による測定の再現性の問題がしばしば強調されることに注意してください。

FRAP(第二鉄還元抗酸化力)

FRAP試験は鉄イオンに対する抗酸化剤の還元能力を測定します。 それは鉄イオンがFe 3+からFe 2+へ通過する電子移動に基づく方法である。 pH(3.6)の特定の条件下およびTPTZ(2,4,6−トリス(2−ピリジル)−s−トリアジン)の存在下では、これらのイオンは異なる特性を有する錯体、特に還元誘導体(Fe 2+)を形成する。 −TPTZ)は、分光光度的に測定することができる593nmに最大吸収を有する青色を呈する。 したがって、抗酸化物質の還元能力は、標準物質(例えばアスコルビン酸)に対する変動と比較することによって確立された波長における酸化剤を含有する溶液の吸光度の変化として測定することができる。

FRAPテストは、プラズマの還元力を測定するように設計されていましたが、純粋な化合物と複雑なマトリックスの酸化防止能力をテストするように調整されました。 事実、この方法では水素移動を介して作用する抗酸化剤の作用を完全に無視して電子移動による還元能力のみを評価することができるので、抗酸化剤の役割を果たすチオールやタンパク質などの分子の寄与を測定することはできない。体液(血液など)の基本です。 この方法を使用することの利点は、それがインビトロで抗酸化能力を決定するための最も簡単で、最も速くそして最も安価な方法の一つであるということである。

DPPHテスト

2,2-ジフェニル-1-ピクリルヒドラジル(DPPH・)は、非常に安定で市販されている窒素ラジカルであり、強い赤紫色を特徴とし、抗酸化能力を有する分子の存在下で還元されると鈍くなる。 抗酸化化合物との反応後のDPPH溶液の吸光度の変化の517nmでの分光光度測定によって、それが水素移動または電子移動のどちらで作用するかにかかわらず、試験物質の還元能力を定量することが可能である。 結果は一般にIC 50、すなわち初期DPPH濃度を50%減少させることができる酸化防止剤の量として表される。

これは、素早く簡単で安価な方法です。 この分析技術の限界は、検査中の分子が同じ波長範囲のDPPHラジカルを吸収する場合、または立体的に束縛されていない大きな分子が存在する場合、分析結果が歪む可能性によって与えられる。それらはラジカルの反応性部分と反応するようになる。 これにより、DPPHはペルオキシルラジカルよりも最大1000倍遅く酸化防止剤と反応します。

PCLテスト(光化学ルミネセンス)

PCL試験は、紫外線によって光化学的に生成された特定のラジカル種、スーパーオキシドアニオン(O 2・ - )と化学発光を放出することができる化合物との反応に基づいている。 使用されるマーカーはルミノールであり、これはフリーラジカルによって酸化されると特別な機器(Photochem(登録商標))を使用して測定することができる光を発する分子である。 配給混合物中の酸化防止物質の存在はラジカル化学種を不活性化して化学発光の放出を抑制する。 PCL分析は非常に迅速かつ高感度です。 さらに、ACW(抗酸化能力水溶性)とACL(抗酸化能力脂溶性)と呼ばれる2つの異なる分析プロトコルを適用することで、同じ化合物の水溶性成分(フラボノイド、ビタミンE)の総抗酸化能力に対する寄与を測定できます。脂溶性のもの(トコフェロール、トコトリエノール、カロチノイドなど)よりもC、アミノ酸など)。 検査中の生成物の抗酸化能力は、記録された値を、標準参照分子、ACLプロトコルについてはアスコルビン酸、およびACWプロトコルについてはTroloxに関する測定値と比較することによって得られる。